91.
(11) Номер патента: 2151188
(46) Дата публикации: 20.06.2000
(51) МПК7: C 12 Q 1/68, C 12 N 15/11, G 01 N 33/48
(21) Номер заявки: 99112665/13
(22) Дата подачи заявки: 16.06.1999
(71) Заявитель:
Институт цитологии и генетики СО РАН,
Научно-исследовательский институт терапии СО РАМН
(72) Изобретатель:
Юдин Н.С.,
Воевода М.И.,
Кобзев В.Ф.,
Ромащенко А.Г.
(73) Патентообладатель:
Ромащенко Аида Герасимовна,
Юдин Николай Серафимович
(98) Адрес для переписки:
630090, г.Новосибирск, пр. Лаврентьева 10, ИЦиГ СО РАН, патентный отдел, Кучумовой Л.Я.
(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ МУКОВИСЦИДОЗА
(57)
Настоящее изобретение относится к молекулярной биологии и медицине. Предложенный способ заключается в следующем: геномную ДНК выделяют из 5-10 мл периферической крови по стандартной методике с использованием протеиназы К с последующей экстракцией фенол/хлороформом. Для амплификации нормального аллеля используют прямой праймер 5'-GGCAC-CATTA-AAGAA-AATAT-CATCTT-3', оканчивающийся на 3'-конце тринуклеотидом CTT, отсутствующем в мутантном аллеле. Для амплификации аллеля с делецией используют прямой праймер 5'-GGCAC-CATTA-AAGAA-AATAT-CATTG-G-3' , без CTT, оканчивающийся последующим за ним тринуклеотидом TGG на 3'-конце. В качестве обратного праймера для амплификации обоих аллелей используют праймер 5'-CATTC-ACAGT-AGCTT-ACCCA-3'. Способ отличается простотой, точностью и повышенной надежностью диагностики. 1 з.п. ф-лы, 1 ил.
Электрофореграмма. Больной под N 1 оказался гомозиготой по делеции )F508 (наличие одной полосы размером 219 п.н. - дорожки 1 и 2). Больной под N 3 оказался гетерозиготой по делеции )F508 (наличие полос на нормальный и на мутантный аллели - дорожки 5 и 6). У больных N 2, 4 и 5 мутантный аллель не был выявлен (наличие одной полосы размером 222 п.н. - дорожки 3, 4, 7, 8, 9 и 10).
|
|
